Abstracto

Replicación y traducción de genes del virus de la hepatitis B introducidos por los espermatozoides en células embrionarias

Qiu-Ju Zhang, Ying Zhong, Ji-Hua Huang, Qing-Dong Xie, Xiao-Fang Tan, Chen-Yao Zhong, Lan Xu, Tian-Hua Huang

Objetivo: Dado que el virus de la hepatitis B (VHB) puede infectar a los espermatozoides humanos y que los genes del VHB introducidos por los espermatozoides pueden transcribirse en embriones en desarrollo, buscamos confirmar la presencia de antígenos maduros del VHB y evaluar el mecanismo de replicación del gen viral en células embrionarias. Métodos: Se transfectaron espermatozoides humanos con plásmidos recombinantes pIRES2-EGFP-HBs o pIRES2-EGFP-HBc y luego se utilizaron para fertilizar óvulos de hámster dorado sin zona. Se recolectaron embriones bicelulares con y sin fluorescencia verde para la detección de ADN o proteína del VHB mediante hibridación in situ fluorescente (FISH), ensayo de inmunofluorescencia (IA) y ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA). Resultados: 1. Se observaron señales FISH positivas para ADN HBs y HBc en los núcleos de los espermatozoides y en los núcleos de los embriones bicelulares en las muestras de prueba, pero no se detectaron en los controles. 2. Se detectaron señales IA positivas para HBsAg o HBcAg dentro del citoplasma de los embriones de dos células en las muestras de prueba, pero no en los controles. 3. Utilizando ELISA, el nivel de HBsAg en un solo embrión de dos células fue de 0,064 ng/ml. Asimismo, se detectó HBcAg en el grupo experimental de cinco embriones. Conclusión: Los genes S o C del VHB introducidos en el esperma pudieron replicar concomitantemente el genoma del embrión huésped a través de un modo semiconservativo de replicación del ADN y pudieron expresar proteínas virales en las células embrionarias.