Abstracto

Glucoamilasa termoestable ácida degradante de almidón crudo de Aspergillus fumigatus UFC-01: purificación y caracterización para aplicación biotecnológica

Adeyemi O Ayodeji, Frank A Ogundolie, Olufemi S Bamidele, Ayodele O Kolawole y Joshua O Ajele

Las mejoras en el proceso industrial involucrado en la degradación del almidón han llevado a la búsqueda de enzimas amilolíticas termoestables que aman la sal , especialmente la glucoamilasa, una enzima que puede hidrolizar completamente el almidón a glucosa. En esta investigación, la glucoamilasa se produjo de manera óptima en un cultivo líquido de Aspergillus fumigatus y se purificó hasta homogeneidad mediante precipitación con sulfato de amonio, cromatografía de intercambio iónico y filtración en gel, dando un rendimiento de 8,19% con una purificación de 20 veces. La glucoamilasa de 50 kDa, cuyo peso molecular se estimó mediante electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecil sulfato de sodio (SDS-PAGE), fue altamente estable en un amplio rango de pH en la región ácida y también termoestable; retuvo aproximadamente el 70% de la actividad inicial después de 60 min de incubación a 60ºC. La enzima purificada fue activa en amilosa, dextrano y diferentes almidones con valores de Km _y Vmax _de 1,59 mg/mL y 14,33 U/mg respectivamente, cuando se utilizó almidón de yuca crudo como sustrato. Notablemente, esta glucoamilasa posee alta propiedad de tolerancia a la sal , con alrededor del 50% de actividad residual después de 24 h de incubación en solución de NaCl 3,0 M. Algunos iones metálicos incluyendo K ⁺ , Ca2 ⁺ y Mg2 ⁺ fueron activadores de la enzima mientras que Cu2 ⁺ , Pb2 ⁺ y Hg2 ⁺ inhibieron su actividad. Las características bioquímicas únicas de esta glucoamilasa la califican para uso biotecnológico especialmente en las industrias de alimentos, productos farmacéuticos y biocombustibles .