Saleem Basha y Kandasamy Ulaganathan
Se purificó una enzima quitinasa, Chi25, a partir del sobrenadante de la cepa BC121 de Bacillus subtilis cultivada mediante precipitación con sulfato de amonio y cromatografía de afinidad con quitina. La pureza de la enzima se confirmó mediante análisis SDS-PAGE y RP-HPLC y se estimó que el peso molecular de la enzima era de aproximadamente 25 kDa. La enzima fue estable en un rango de pH de 6 a 7,5, mientras que el pH óptimo para la actividad enzimática fue 6,5. Chi25 fue estable en un rango de temperatura de 25 a 40 °C, siendo 35 °C la temperatura óptima para la actividad. El bioensayo de Chi25 demostró la inhibición de la germinación de esporas y la extensión de hifas de hongos fitopatógenos importantes. Los resultados de los ensayos en invernadero revelaron que la cepa de tipo silvestre (BC121) redujo la incidencia del marchitamiento por fusarium en un 80%. El análisis comparativo de la cepa de tipo salvaje (BC121) y la cepa mutante de esta bacteria (BC121M) reveló que el antagonismo de la cepa BC121 contra hongos fitopatógenos tanto in vitro como in vivo se debe a la enzima Chi25.