Abstracto

Construcción de un vector de interferencia de ARN estable y de alta eficiencia para Penicillium sp.

Haizhao Xue, Yibo Hu, Xiaoran Fang, Guangshan Yao, Xin Song

La interferencia de ARN (RNAi), que puede inhibir la expresión génica de manera eficaz y específica, ha demostrado un gran potencial en la investigación de la función génica y la modificación génica. En este estudio, se construyó un vector de interferencia de ARN pHX-RNAi, que lleva un casete de resistencia a la higromicina y una unidad transcripcional para la expresión de ARN en horquilla . Se inhibió específicamente un gen amy15A que codifica la principal amilasa en una cepa productora de alta celulosa, Penicillium oxalicum A11. Los resultados de SDS-PAGE y RT-qPCR mostraron que tanto los niveles de transcripción como de secreción de Amy15A se regulaban a la baja de manera drástica, lo que implica que la interferencia de ARN desempeña un papel importante en la regulación de la expresión génica postranscripcional. Todos los transformantes resistentes a la higromicina con las construcciones de silenciamiento mostraron un alto grado de silenciamiento en la expresión de amy15A. Considerando el conservadurismo de la maquinaria de interferencia de ARN en hongos, el vector de interferencia de ARN establecido en este estudio, pHX-RNAi, podría aplicarse a otros hongos filamentosos.