Abstracto

Efectos de Scriptaid sobre el ciclo celular y la acetilación de histonas de células de cúmulos de donantes nucleares ovinos y su capacidad para apoyar el desarrollo de embriones de transferencia nuclear de células somáticas

Hui Cao, Wenlong Su, Junjie Li, Bingqiang Wen, Shujun Tian, ​​Shuchun Sun, Lu Li, Hanyang Wang y Jiexin Li

Evidencias contundentes sugieren que el inhibidor de la histona deacetilasa (HDACi) influye en el desarrollo de embriones de transferencia nuclear de células somáticas (SCNT). El presente estudio se realizó para determinar el efecto del pretratamiento de células del cúmulo de donantes con Scriptaid (un nuevo HDACi) sobre el ciclo celular, la acetilación de histonas y el desarrollo de embriones de clonación en ovinos. Primero, optimizamos la eficiencia de Scriptaid en una dosis (0, 0,1, 0,2, 0,4 y 0,8 μmol/L) y dependiente del tiempo (0, 12, 24, 36 y 48 h) sobre la capacidad de desarrollo de estos embriones. Luego, evaluamos cuantitativamente las alteraciones de los niveles de acetilación en la histona H3 lisina 9 (acH3K9) y la histona H4 lisina 12 (acH4K12) de células del cúmulo y embriones SCNT mediante tinción de inmunofluorescencia. Además, detectamos la proporción de células en fase G0/G1 en las células del cúmulo. Encontramos una mejora significativa en las tasas de desarrollo de blastocisto de los embriones de clonación derivados de células del cúmulo de donantes pretratadas con una dosis leve (0,2 μmol/L) de Scriptaid durante 24 horas (21/86 [24,39%] frente a 11/85 [12,91%]; P<0,05). Mientras tanto, los niveles de acH3K9 y acH4K12 también mejoraron significativamente en las células del cúmulo y en los embriones SCNT (P<0,05). Además, más células del cúmulo pretratadas con Scriptaid estaban en fase G0/G1 en comparación con el grupo de control (84,22% frente a 75,96%, P<0,05). En conclusión, las células del cúmulo de donantes tratadas con Scriptaid son beneficiosas para el desarrollo temprano de embriones de SCNT, aumentando la proporción de células del cúmulo en fase acH3K9/ acH4K12 y G0/G1. Scriptaid puede utilizarse para mejorar la eficiencia de la transferencia nuclear de células somáticas en ovinos.