Abstracto

Inducción de daño del ADN, apoptosis celular y punto de control del ciclo celular mediante el uso de kaempferol

Damin Liang1, Xiaoju Cheng2, Ziping Zhang1, Zhengjiu Yang1, Tingchao Li 3*, Peng Tian3,2*

Objetivo: La resistencia a los fármacos es la principal causa del fracaso de la quimioterapia en el carcinoma hepatocelular. El kaempferol (KAE) es un compuesto flavonoide natural que tiene un cierto efecto potenciador de la quimiosensibilidad. Sin embargo, el posible mecanismo molecular del KAE para revertir la resistencia a los fármacos en el carcinoma hepatocelular sigue sin estar claro.

Métodos: Se utilizó RT-qPCR para evaluar el efecto de interferencia de siDNAPKcs. Se utilizaron ensayos RT-qPCR y WB para detectar la expresión de ARNm y proteína de genes relacionados con la reparación del daño del ADN (γ-H2AX, DNA-PKcs, Artemis) y el gen de la bomba de administración de fármacos (P-gp). Se utilizó citometría de flujo para detectar el ciclo celular y la apoptosis.

Resultados: En este estudio, encontramos que KAE aumentó significativamente los niveles de ARNm y proteína de γ-H2AX, y reguló negativamente los niveles de ARNm y proteína de DNA-PKcs y Artemis, por otro lado, también reguló negativamente los niveles de ARNm y proteína de P-gp, y en última instancia promovió conjuntamente el daño al ADN, la apoptosis celular y la detención del ciclo celular en la fase G2/M de células Bel-7402/5-Fu resistentes a fármacos. Mecánicamente, KAE promovió principalmente la degradación de DNA-PKcs a través de la vía del proteasoma de ubiquitina, reguló negativamente el nivel de proteína de DNA-PKcs, inhibió la vía DNA-PKcs/Artemis y promovió el daño al ADN, indujo la apoptosis celular y la detención del ciclo celular.

Conclusión: KAE puede utilizarse como sensibilizador para el tratamiento clínico de la resistencia a la quimioterapia del CHC, y la inhibición de DNA-PKcs también puede convertirse en una nueva estrategia y objetivo para el tratamiento del CHC.