Abstracto

Estudios de cinética enzimática de la nucleósido difosfato quinasa en eritrocitos humanos y distribución de frecuencia en sujetos sanos y receptores de trasplantes en la población Han china

Rufei Shen, Chunxiao Yang, Xiaomei Luo, Tingyu Yang, Jiali Zhou, Yani Liu, Shaojun Shi*

La quinasa de difosfato de nucleósido (NDPK), como proteína de mantenimiento, participa en varios procesos moleculares, incluida la transducción de señales, la energía y el metabolismo de fármacos. El objetivo principal fue investigar la cinética de NDPK en eritrocitos humanos y monitorear la distribución de frecuencia de los niveles de actividad de NDPK en sujetos sanos chinos y receptores de trasplantes. MÉTODOS: La actividad de NDPK en eritrocitos se detectó mediante un método validado de cromatograma líquido de alto rendimiento de par iónico. Los estudios de cinética de NDPK se llevaron a cabo sistemáticamente. Los niveles de actividad de NDPK se determinaron en 500 sujetos sanos, 250 receptores de trasplante de riñón y 250 receptores de trasplante de hígado en la población Han china. RESULTADOS: Los estudios de estabilidad térmica y de pH indicaron que NDPK era relativamente estable a una temperatura de 30-45 ºC y un pH de 6,0-9,0. En el estudio de dependencia del sustrato, la constante aparente de Michaelis-Menten (Km) y la velocidad máxima de reacción enzimática (Vmax) aumentaron con la concentración de sustratos. Mientras tanto, en el estudio de inhibición del producto, con el aumento de la concentración de dATP, la Vmax de dADP disminuyó con Km constante y la Km de dGTP aumentó con Vmax constante. Los niveles de actividad de NDPK revelaron una variabilidad de 7 veces y no se distribuyeron normalmente en todos los grupos. Los niveles de actividad de NDPK fueron significativamente (P<0,05) más altos en el grupo de trasplante que en el grupo de salud. Además, se habían demostrado niveles de actividad de NDPK mucho más altos (P<0,001) en los receptores de trasplante de hígado en comparación con los casos de trasplante de riñón. CONCLUSIONES: Los estudios de cinética de NDPK indicaron dependencia del sustrato de NDPK y un mecanismo de "ping-pong" para la inhibición de la producción. Se mostraron distribuciones asimétricas de los niveles de actividad de NDPK en la población del estudio. Los receptores de trasplante mostraron niveles de actividad de NDPK más altos en comparación con los sujetos sanos.