Abstracto

Descifrando los detalles químico-biológicos de la unión de la aspirina a las proteínas

Hang-Xing Xiong, Hong-Lin Wang, Hua-Xin Zhang y Li-Wei Li

Las teorías de extinción de fluorescencia y transferencia de energía por resonancia de fluorescencia (FRET) se utilizan ampliamente en el estudio de la unión de fármacos y proteínas, pero el efecto del filtro interno no siempre se corrige, lo que puede causar resultados inexactos. En vista de esto, se estudió la interacción de la aspirina (ASP) con la albúmina sérica humana (HSA) mediante espectros de fluorescencia tridimensionales, espectros ultravioleta, espectros de dicroísmo circular (CD) y métodos de modelado molecular. El efecto interno se restó de los datos brutos de la fluorescencia al evaluar el número de sitios de unión, las constantes de equilibrio y los parámetros termodinámicos. Los resultados mostraron que solo se formó un sitio de unión en HSA y que obviamente se vio afectado por el aumento de la temperatura. El cambio negativo de energía libre de Gibbs (Gθ) sugirió que la unión fue espontánea. Mientras tanto, el cambio negativo de entalpía (Hθ) y el cambio de entropía (Sθ) indicaron que los enlaces de hidrógeno tuvieron una influencia importante en la formación del complejo ASP-HSA. La distancia entre el donante y el aceptor se calculó de acuerdo con la teoría de transferencia de energía por resonancia sin radiación de Förster utilizando los datos de fluorescencia corregidos. Los espectros sincrónicos implicaron que la polaridad del residuo de triptófano aumentó, lo que dio una pista sobre la ubicación de la unión. Los espectros de CD se emplearon para detectar los cambios estructurales secundarios de HSA. Con base en los resultados experimentales, se realizó un modelado molecular para calcular el modo de acoplamiento más optimizado, en el que se involucraron tanto el panorama como los detalles.