Abstracto

Un método de cromatografía líquida – espectrometría de masas para la determinación del ácido alfa-cetoglutárico en plasma humano.

Gundoju Suresh, PE Thirugnanam y Atmakuru Ramesh

El ácido alfa-cetoglutárico (A-KG) se encuentra actualmente bajo investigación como prometedor agente dañino para las células cancerosas y antídoto contra el cianuro. Se desarrolló un método simple y específico de cromatografía líquida-espectrometría de masas (LC-MS/MS) para la determinación cuantitativa de A-KG en plasma humano. La derivatización de A-KG se logró utilizando N-metil imidazol en presencia de anhidrato trifluoroacético. Se optimizaron varios parámetros que afectaron el rendimiento de la reacción de derivatización, como la temperatura y el tiempo de reacción. Se extrajo un derivado de imidazol de A-KG utilizando metil terbutil éter y se cuantificó en modo de ionización por pulverización de electrones positivos (relación masa-carga (m/z): 197). El método se validó completamente utilizando parámetros como especificidad, linealidad, límite de detección y cuantificación, precisión, exactitud, recuperación, robustez y robustez. Se demostró linealidad en el rango de concentración de 100-2500 ng mL-1 con un coeficiente de correlación (R2) de 0,9991. Se encontró que el límite de detección y cuantificación era de 40 y 100 ng mL-1 respectivamente. La exactitud y precisión intradiaria e interdiaria se encontraban dentro del límite aceptable (<8%). La robustez y la robustez se evaluaron utilizando el diseño experimental de Plackett-Burman.