Abstracto

La adición de antibióticos a los medios de cultivo de embriones provocó una expresión alterada de genes en vías que regulan la integridad del ADN en blastocistos de ratón

Yan Li1, Qianqian Han2, Xu Ji3, Lu Chang3, Wenjuan Li3, Jianfeng Shi2, Jing Liu3, Wuhua Ni1, Xuefeng Huang1, Chris O'Neill4, Xingliang Jin1,4*

Los antibióticos son componentes comunes de los medios de cultivo de embriones y minimizan el riesgo de contaminación microbiana e infección durante los procedimientos de tecnología de reproducción asistida (TRA). Los efectos de dos antibióticos aminoglucósidos (gentamicina, estreptomicina) y penicilina en los perfiles globales de expresión génica (GE) se evaluaron mediante RNA-seq de blastocistos de ratón individuales. Los cigotos se cultivaron en una formulación de medio definido optimizado (KSOM) a la que se agregó un rango de dosis de cada antibiótico. Se observó un retraso dependiente de la dosis de la tasa de desarrollo del cigoto a blastocisto morfológicamente normal y esto estuvo acompañado por una reducción en el número de células presentes dentro de los blastocistos resultantes. Estos blastocistos exhibieron la menor capacidad en el crecimiento adicional de 96 horas in vitro. La dosis más baja de cada antibiótico probado (similar a las concentraciones utilizadas en medios de grado clínico) causó una expresión diferencial significativa de aproximadamente 1800 genes. En la mayoría de los casos, el tratamiento con antibióticos provocó una reducción de la expresión génica y el análisis de ontología génica mostró que los genes regulados a la baja se enriquecieron para varios procesos biológicos relacionados con el mantenimiento de la integridad genómica. Los tres antibióticos provocaron la regulación a la baja de Brca2, Blm, Rad51c y Rad54l, genes implicados en vías de recombinación homóloga del ADN y también varios genes dependientes de p53. Los estudios de inmunolocalización mostraron que cada antibiótico también redujo el nivel de BRCA2 y RAD51C detectados dentro de los blastocistos. El presente estudio muestra que la suplementación de medios de cultivo de embriones con antibióticos está asociada con alteraciones de amplio alcance en la expresión génica de una manera que podría comprometer potencialmente la integridad genómica de los embriones resultantes.