Abstracto

Identificación y cuantificación de Tilletia caries y T. controversa en muestras de semillas y discriminación de las dos especies

Zgraja G, Kramer S, Jonitz A y Wagner W

El carbón hediondo o común, causado por Tilletia caries, y el carbón enanista del trigo, causado por T. controversa Kühn, son importantes enfermedades transmitidas por las semillas de especies de cereales y pastizales (Graminaceae). Los niveles de contaminación son controlados rutinariamente por organismos de certificación o laboratorios de control oficiales. Informamos de varios ensayos de PCR que se desarrollaron para la identificación y cuantificación de Tilletia spp. en muestras de trigo y espelta contaminadas. Un segmento de 140 pb de la región ITS se amplifica con PCR cualitativa para fines de detección o con PCR en tiempo real para cuantificación. El método se validó con éxito tanto internamente como en una prueba de competencia en comparación con otros métodos establecidos. Además, se desarrolló una PCR-RFLP para la discriminación de especies. Utilizando HinfI como endonucleasa de restricción, la secuencia PRB2 de T. caries se digiere en tres fragmentos, mientras que en T. controversa solo hay dos. En los análisis de rutina y el seguimiento de lotes de semillas o materias primas para piensos, este enfoque de PCR es una alternativa adecuada a los métodos microscópicos tradicionales, que requieren mucho tiempo y son laboriosos.