Abstracto

Evaluación de un método para la detección de Mycobacterium tuberculosis viable mediante microscopía LED en muestras de esputo para el seguimiento del tratamiento de la tuberculosis

Kanakaprasad A*, Bharathidasan, Hema Sundaram, D Farah Deeba, Nirmala AR, Abdul Azeem

El seguimiento de la respuesta de los pacientes al tratamiento antituberculoso (TTA) requiere herramientas de seguimiento del tratamiento básicas y eficaces. La herramienta de seguimiento que se utiliza habitualmente en los laboratorios de tuberculosis periférica en entornos con recursos limitados es la observación microscópica de los bacilos acidorresistentes mediante tinción fluorescente de Ziehl-Neelsen (ZN) o Auramina O. Si el paciente presenta frotis positivo al tercer mes de iniciado el tratamiento, se realiza un seguimiento de la viabilidad del bacilo en el esputo mediante cultivo de Mycobacterium tuberculosis (M.tb) y pruebas de sensibilidad a fármacos (C y DST).

La positividad del frotis al quinto mes o más tarde de iniciado el tratamiento indicaría un posible fracaso del mismo. Es importante señalar que la microscopía simple no puede distinguir entre bacilos viables y muertos. Un gran número de pacientes en tratamiento pueden seguir expectorando bacilos muertos de las cavidades pulmonares necróticas y, por lo tanto, ser clasificados como "con frotis positivo" aunque respondan al tratamiento. Por lo tanto, corren el riesgo de recibir regímenes de tratamiento prolongados o revisados ??en entornos con acceso limitado al cultivo de M. tuberculosis . El cultivo de esputo puede identificar bacilos viables, pero se requieren varias semanas para llegar a los resultados, personal de laboratorio capacitado e infraestructura.

Estudios recientes proponen un método sencillo para el seguimiento del tratamiento de la tuberculosis que puede realizarse en los laboratorios periféricos de tuberculosis con infraestructura preexistente. Se trata de una técnica Point of Care (POC) basada en la capacidad de marcado de viabilidad fluorescente del diacetato de fluoresceína (FDA), como tinción para la microscopía de frotis de esputo.

Se comparó la eficacia de la tinción con diacetato de fluoresceína (FDA) en la detección de Mycobacterium tuberculosis viable en 567 muestras de esputo de casos de seguimiento de PTB con el crecimiento en sistemas de cultivo líquido automatizados (positividad del cultivo del 97,64%). La sensibilidad de la FDA fue moderada (97,62%, con un intervalo de confianza del 95%) y la especificidad fue (98,4%). El valor predictivo negativo del 94,8% fue alentador en la razón de verosimilitud negativa de ganda de 0,2, lo que sugirió el uso de este método para descartar el fracaso del tratamiento en entornos de bajos ingresos y alta carga.