Abstracto

Desarrollo de un método analítico para la determinación plasmática de cinco antiepilépticos y sus metabolitos mediante HPLC: comparación con métodos inmunoanalíticos

Kaouthar Louati, Sarah Mahfoudhi y Fathi Safta

Como el bioanálisis surgió como una herramienta crítica en el proceso de descubrimiento y desarrollo de fármacos, y es deseable la disponibilidad de metodologías analíticas menos costosas, más rápidas y más simples para apoyar los estudios de detección de interacciones farmacológicas con validación estadística en un amplio rango de concentraciones, el objetivo de este trabajo es desarrollar un método de cromatografía líquida de alto rendimiento simple, rápido y rentable para la cuantificación simultánea de la concentración plasmática humana de seis fármacos antiepilépticos utilizados con frecuencia en la práctica clínica (fenobarbital, lamotrigina, oxcarbazepina, monohidroxicarbazepina, carbamazepina y fenitoína). Se utilizó clonazepam como estándar interno. La preparación de la muestra consistió en un paso de desproteinización con acetonitrilo. Después de la extracción, los analitos se separaron en una columna de fase inversa C18 termostatizada a 25 °C. La fase móvil estaba compuesta por un 50% de tampón de fosfato (pH=7,5) y un 50% de metanol/acetonitrilo (80:20, v/v), bombeado isocráticamente a 1 mL/min. El detector UV se ajustó a 215 nm. El tiempo total de ejecución fue de solo 10 min. Los valores de rendimiento de extracción estuvieron entre el 84% y el 99%. Todos estos antiepilépticos se separan con buenas formas de pico y un factor de resolución mayor que 2. El nuevo método demostró ser simple y rápido. Las curvas de calibración fueron lineales con coeficientes de regresión mayores que 0,998. El CV% de precisión intradiaria e interdiaria varió entre el 0,91% y el 5,69%. El valor de sesgo para la precisión varió entre el 2,42% y el 1,27%. Las recuperaciones de extracción absolutas medias en niveles de muestra de control de calidad baja, media y alta variaron entre el 84,17% y el 99,02%. Este método bioanalítico se aplicó con éxito a muestras de plasma reales de 26 pacientes epilépticos. Nuestros resultados se compararon con los obtenidos mediante métodos de inmunoensayo en el laboratorio de bioquímica y toxicología del hospital FATTOUMA y en el Centro de Farmacovigilancia de Túnez. El método desarrollado parece ser una herramienta adecuada para el seguimiento terapéutico rutinario de medicamentos y también para respaldar otros estudios clínicos basados ??en la farmacocinética.