Abstracto

Congreso de Biotecnología 2015: Nanosistemas formados por complejos anfifílicos de antimonio(v) que incorporan anfotericina B para el tratamiento de la leishmaniasis - Arshad Islam - Universidade Federal de Minas Gerais

Arshad Islam, Juliane S Lanza, Flaviana R Fernandes, Delia CM Santos, Lucas AM Ferreira, Cynthia Demicheli, Maria N Melo y Frédéric Frézard

Este trabajo tuvo como objetivo desarrollar una formulación oral de anfotericina B (AmB) para el tratamiento de la leishmaniasis. La AmB es un polienzima macrólido antifúngico y antibacteriano derivado de la cepa Streptomyces nodosus, que pertenece al grupo de fármacos antileishmaniacos de segunda generación y se utiliza ampliamente en caso de fracasos en el tratamiento con compuestos antimoniales. La AmB se incorporó en nanosistemas formados por complejos anfifílicos de antimonio (V) con ligandos de la serie alquilmetilglucamida (L8 y L10, con cadena de 8 y 10 carbonos, respectivamente). La tasa de incorporación de 0,2% de AmB en dispersiones de SbL8 y SbL10 se determinó utilizando una técnica basada en HPLC y se encontró que era de 84 ± 1% y 74 ± 1%, respectivamente. La caracterización de SbL10-AmB y SbL8-AmB mediante dicroísmo circular y espectroscopias UV-visibles mostró que AmB está presente predominantemente en forma monomérica en los nanosistemas SbL8 y Sb10, que es la forma menos tóxica para el huésped y potencialmente la más biodisponible. Se evaluó el potencial para el tratamiento oral de la leishmaniasis visceral (LV) y cutánea (LC) en modelos murinos en comparación con el fármaco estándar Anforicin B® o Glucantime® administrados por vía intraperitoneal u oral. En ratones Balb/c infectados con Leishmania amazonensis, la formulación mixta SbL10-AmB (170 mg Sb/kg y 14 mg AmB/kg, cada 2 días por vía oral) resultó en una disminución significativa del tamaño de la lesión, en comparación con Glucantime® y SbL10 administrados por vía oral (170 mg Sb/kg, cada 2 días), Anforicin B® (>1 mg/kg/cada 5.º día, por vía intraperitoneal) y el grupo control con solución salina. En ratones Balb/c infectados con Leishmania infantum, tanto la formulación mixta SbL10-AmB como la SbL8-AmB administradas por vía oral (170 mg Sb/kg y 14 mg AmB/kg por día) redujeron significativamente la carga parasitaria en el hígado en comparación con el control no tratado, a un nivel similar al de AmB administrada por vía intraperitoneal (0,9 mg/kg/día). Este estudio estableció por primera vez el potencial de las formulaciones mixtas SbL10-AmB y SbL8-AmB para el tratamiento oral de la leishmaniasis cutánea y visceral, lo que indica su potencial para un mayor desarrollo y aplicaciones. La impedancia de ARN (ARNi) se ha desarrollado como una estrategia increíble en el estudio de la genómica útil, así como el control de plagas de plantas. En este informe, los ARN doblemente aislados (ARNdc) dirigidos contra la enzima 3-hidroxi-3-metilglutaril coenzima A reductasa (HMGR), que catalizan una respuesta enzimática que limita la velocidad en la vía del mevalonato de la combinación de la hormona juvenil (JH) en el gusano cogollero del algodón, se comunicaron en plantas de algodón mediante la mutación mediada por Agrobacterium tumefaciens. La PCR y la investigación de Sothern descubrieron la unión de la enzima HMGR al genoma del algodón. La RT-PCR y la qRT-PCR confirmaron el alto nivel de interpretación de la dsHMGR en líneas de algodón transgénico.La expresión de HMGR, tanto en el nivel de expresión como en el de expresión, se redujo drásticamente en las crías de gusanos del algodón (helicoverpa armigera) después de alimentarse de hojas de plantas transgénicas HMGR. El nivel de expresión de la calidad de HMGR en las crías criadas en hojas de algodón transgénico fue hasta un 80,68% menor que el de la especie silvestre. Además, el nivel relativo de expresión de la calidad de vitelogenina (Vg, fuente vital de sustento para el desarrollo de organismos incipientes en la posteridad) también se redujo en un 76,86% cuando las crías de insectos se alimentaron con hojas transgénicas. Los resultados de los bioensayos de insectos indicaron que la planta transgénica que alberga dsHMGR restringió el aumento de peso neto y retrasó el crecimiento de las crías de gusanos del algodón. En conjunto, los dsRNA que comunican plantas de algodón transgénicas redujeron eficazmente la calidad de HMGR y obstaculizaron el desarrollo y la supervivencia de los insectos objetivo, lo que dio más opciones al control de insectos. Frases clave: 3-hidroxi-3-metilglutaril coenzima A reductasa (HMGR), gusano cogollero del algodón, inhibición del ARN, algodón transgénico, ARN doblemente libres, control de plagas. El algodón (Gossypium hirsutum) es un importante productor de fibra y producción económica en todo el mundo, que muestra una evidente importancia en la producción de cultivos. Las plagas y los crecimientos patógenos presentan una preocupación principal para la producción y la calidad del algodón. Actualmente, el principal parásito en la producción de algodón es el gusano cogollero del algodón (Helicoverpa armigera). A pesar del amplio desarrollo del algodón transgénico BT resistente a los insectos que demuestra enormes ventajas económicas y sociales 1, las transformaciones de la calidad del gusano cogollero entre generaciones y las determinaciones que surgen debido a las proteínas resistentes a los insectos BT proporcionan al gusano cogollero protección contra los cultivos transgénicos BT 2-6. Por lo tanto, los cultivos transgénicos de resistencia a los insectos con procedimientos alternativos son atractivos. La inhibición del ARN (RNAi), una poderosa herramienta de inhibición de la calidad en eucariotas, se ha encontrado en Caenorhabditis elegans 7 simplemente porque y después se desarrolló como un poderoso sistema de protección contra insectos en una amplia variedad de especies de plantas 8, 9. El ARN de doble cadena (dsRNA) se puede generar mediante interpretación interna, transposón, transgénesis forzada y infección por ARN, que son detectados y descompuestos en pequeños ARN interferentes (siRNA) por la endorribonucleasa Dicer. El complejo silenciador activado por ARN (RISC), que incluye siRNA y algunas proteínas, por ejemplo, endonucleasas, exonucleasas y helicasas, muestra la capacidad de las nucleasas para detectar y cortar ARN objetivo específico 10. Por lo tanto, el RNAi se puede utilizar de forma engañosa para bloquear la declaración de calidad endógena. Al compartir un sistema atómico básico de disposición de calidad explícita en una amplia variedad de variedades animales, el RNAi activado por dsRNA exógeno ha sido creado como una de las herramientas más productivas para el estudio de la capacidad de calidad 11 así como el control de plagas 12-16.El dsRNA entregado por plantas transgénicas contra la calidad clave de las plagas se ha visto como un escudo que proporciona a las plantas transgénicas inocuas un nuevo desarrollo 17, 18. El gusano del algodón experimenta un complejo proceso de desprendimiento en su ciclo de vida, cuyo desarrollo y avance están dirigidos coordinadamente por la hidroxiecdisona 19-22 y la hormona adolescente (JH) 22. Los análogos de JH se han combinado de manera engañosa y han aportado nuevas originalidades al trabajo innovador esencial del pesticida 23. Los usos fructíferos de análogos hormonales relacionados con el proceso de desprendimiento indicaron que la inhibición o exageración de hormonas críticas podría ser otro mecanismo para el manejo coordinado de plagas (IPM) de las plagas que pertenecen al Phylum Arthropoda 24. En este sentido, las cualidades críticas o los factores de interpretación involucrados en las vías de biosíntesis de hormonas se inclinan a ser utilizados como objetivos ideales cuando la innovación de ARNi se aplica al control de plagas 25. La JH se integra a través de la vía del mevalonato en las plagas, en la que el mevalonato es uno de los intermediarios más importantes. La HMG-CoA, precursora de la vía del mevalonato, debe experimentar tres reacciones enzimáticas para convertirse en mevalonato, y la HMGR cataliza y controla la última reacción 26.