Abstracto

Un protocolo sencillo para extraer ADN del tejido de lombrices de tierra para estudios moleculares

Kushwaha T, Vishwakarma A, Rahul Paliwal, Sashidhar Burla y Shweta Yadav

Se ha desarrollado un protocolo sencillo para extraer ADN de alta calidad de diferentes especies de lombrices de tierra de la familia Moniligastridae (Drawida travancorensis D.pellucida, D.parambikimala, D.modesta); Megascolecidae (Perionyx sansibaricus) Octochaetidae (Travoscolides chengannures); Lumbricidae (Octolasion cyaneum,Eisenia andrei, E.fetida) Eudrilidae (Eudrilus eugeniae) recolectados en los Ghats occidentales de la India. Se obtuvo una buena cantidad (261,6 a 151 μg/μl) de ADN. Con protocolo modificado actual. La proporción de A260/A280 también estuvo en el rango de 1,91 a 1,98, mientras que el protocolo de rutina registró 1,48 a 2,24 μg/μl. El ADN extraído se utilizó para amplificar 683 pb del gen de la citocromo oxidasa I (COI) con los iniciadores LCO1490 y HCO2198. Todas las secuencias del gen amplificado se alinearon, editaron y analizaron utilizando el método de máxima verosimilitud para caracterizar diferentes especies de lombrices de tierra. Parece que el protocolo modificado El método utilizado en el presente estudio resultó eficaz y sencillo para extraer ADN de buena calidad de diferentes especies de lombrices de tierra.